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养阴方对HSP65攻击下ApoE+小鼠Thl7、Treg细胞失衡的作用研究

阅读量: 2001 中草药 2019年第5期

社会科学

养阴方对HSP65攻击下ApoE+小鼠Thl7、Treg细胞失衡的作用研究

目的考察在热休克蛋白(HSP) 65攻击下养阴方对载脂蛋白E敲除(ApoE+)小鼠动脉粥样硬化(AS)的病变 及辅助性T细胞17 (Thl7)、调节性T细胞(Treg)的影响及可能机制。方法将ApoE+小鼠分别饲喂普通和高脂饲料, 并分别sc无菌PBS或HSP65,以辛伐他汀为阳性药,研究养明方对AS模型小鼠血脂、斑块、Thl7细胞与Treg细胞比例 (Thl7/Treg)及相关炎症指标的影响。给药方式皆为ig给药,并以等体积生理盐水做对照。采用酯酶法检测血清总胆固醇(TC)、 三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)水平;油红O染色法测定主动脉斑块面积;流式细胞术 测定抗凝血中IL-17A+CD4+ Thl7及Foxp3+CD25+CD4+ Treg细胞数量;ELISA法测定血清白细胞介素-6 (IL-6)、IL-17、IL-2、 转化生长因子-P (TGF-P)、IL-10水平;实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法测定脾脏中Stat3> Stat5a、Foxp3和主动脉中Stat3、 Stat5amRNA 表达;Western blotting 法测定脾脏中磷酸化 STAT3 (pSTAT3)、磷酸化 STAT5 (pSTAT5)、FOXP3 和主动脉中 pSTAT3蛋白表达。结果养阴方使小鼠血清TC、TG、LDL水平显著降低(P<0.01), HDL显著升高(P<0.05);主动脉 斑块面积明显减小(P<0.01);外周血IL47A+CD4+ Thl7细胞显著减少(P<0.05),Fojq)3+CD25+CD4+ Treg显著増加(P<0.05), Thl7/Treg 值大幅下降(尸<0.01);血清 IL-6 水平显著下降(尸<0.05),IL-2 (P<0.01), TGF-P (P<0.05)、IL-10 (P<0.05) 水平显著升高;脾脏pSTAT3蛋白水平下降(P<0.01), pSTAT5 (P<0.01)和FOXP3 (P<0.05)蛋白水平上升;主动脉 Stat3mRNA (P<0.01)和pSTAT3蛋白(P<0.05)水平下降。结论养阴方能够改善HSP65攻击下ApoE+小鼠的高脂血 症及AS,同时调节外周血中Thl7/Treg的平衡和炎症因子的分泌从而改善炎症。养阴方对Thl7、Treg的效应可能与减弱的 IL-6/pSTAT3和増强的IL-2/pSTAT5信号有关。

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