马钱苷人工抗原的合成、鉴定及免疫原性的初步研究

更新时间:2015-10-26

【摘要】目的 首次合成并鉴定马钱苷（loganin）人工抗原，为进一步制备马钱苷单克隆抗体，建立相关免疫分析方法奠定基础。方法 采用高碘酸钠氧化法合成马钱苷免疫原（loganin-BSA）和包被原（loganin-OVA）；应用基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）法鉴定马钱苷人工抗原是否偶联成功；通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA）方法检测免疫小鼠血清中抗马钱苷抗体效价及其特异性。结果 经MALDI-TOF-MS 检测，马钱苷与BSA 偶联成功。竞争抑制曲线表明，血清中的抗体可与马钱苷产生特异性结合，血清抗体效价在1∶40 000。结论 成功合成了马钱苷人工抗原，为马钱苷单克隆抗体的制备及其在中药质量评价和动物体内药动学方面的应用奠定了基础。

【关键词】 马钱苷 人工抗原 单克隆抗体 免疫分析法 高碘酸钠法 免疫原 包被原 基质辅助激光解析电离-飞行时间 质谱法 酶联免疫吸附试验 抗体效价

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