天山雪莲愈伤组织提取物对人成骨肉瘤细胞MG-63 增殖及分化的影响

更新时间:2015-10-26

【摘要】目的 研究天山雪莲愈伤组织提取物（extract from callus of Saussurea involucrate, ESI）对人成骨肉瘤细胞MG-63增殖及分化的影响，探讨ESI 抗骨质疏松的作用及机制。方法 以MG-63 为研究对象，采用MTT 法和乳酸脱氢酶(LDH)法检测ESI 对成骨细胞增殖的影响，相关试剂盒检测碱性磷酸酶（ALP）活性和羟脯氨酸（Hyp）水平，茜素红染色法观察对矿化骨结节形成的影响；实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测骨保护素（OPG）和核因子-κB 活化因子受体配体（RANKL）基因表达水平；Western blotting 法检测OPG/RANKL 蛋白水平；检测p38 特异性抑制剂SB203580 对ESI 作用于成骨细胞增殖、分化、矿化以及OPG/RANKL 表达的影响。结果 ESI 低于125 μg/mL 对成骨细胞无细胞毒性，31.25、62.5 μg/mL 对成骨细胞生长有促进作用；ESI 显著提高ALP 活性、Hyp 水平以及矿化骨结节形成；显著上调MG-63 细胞OPG mRNA 水平，下调RANKL mRNA 水平，上调OPG/RANKL 蛋白水平；SB203580 显著抑制ESI 对成骨细胞增殖、ALP 活性、矿化结节形成的促进作用以及对胶原蛋白积累量和OPG/RANKL 值的提高作用。结论 ESI 能够促进成骨细胞增殖、分化和矿化，其机制可能与调节OPG 和RANKL 基因表达有关，并且可能通过p38 丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路进行信号转导。

【关键词】 天山雪莲 愈伤组织 成骨细胞 I 型胶原蛋白 骨保护素 核因子-κB 活化因子受体配体 p38 丝裂原活化蛋白激酶

阅读全文