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红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析

更新时间:2015-10-26

【摘要】目的 克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量。方法 根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(CtAK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA 为模板,采用RT-PCR 的方法扩增CtAK 基因片段并连接到克隆载体上,经PCR 及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序。同时利用荧光定量PCR 技术对其进行基因表达量的分析。结果 克隆了红花CtAK 基因的核心片段,分离到486 bp 的基因序列。根据CtAK 基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR 分析,CtAK 基因在红花品种川红1 号初花后13 d 表达量最高。结论 系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK 基因具有较高的同源性。

【关键词】

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