山麻黄内生菌Myrothecium roridum LLY 的化学成分及其体外细胞毒活性 研究

更新时间:2015-11-09

【摘要】目的 研究山麻黄Ephedra equisetina 内生真菌Myrothecium roridum LLY 固体发酵产物的化学成分，并进行体外细胞毒活性研究。方法 采用硅胶柱、Sephadex LH-20 凝胶柱色谱和高效液相色谱法进行分离纯化，利用高分辨质谱、核磁共振谱等方法鉴定化合物的结构。MTT 法进行化合物体外细胞毒活性筛选，并采用流式细胞术和Western blotting 法进行化合物细胞毒活性机制初步研究。结果 从M. roridum LLY 固体发酵产物中分离得到9 个化合物，分别鉴定为吩嗪-1-羧酸（1）、1-甲氧基吩嗪（2）、N-methyl-1H-indole-2-carboxamaide（3）、甲基硫赭曲菌素（4）、ditryptophenaline（5）、7,8-二甲基异咯嗪（6）、deoxyleporin B（7）、尿嘧啶（8）和胸腺嘧啶（9）。MTT 测定发现，化合物3 对人肝癌细胞株SMMC-7721 增殖具有一定的抑制活性，其IC50 值为38.0 μg/mL，阳性对照顺铂的IC50 值为11.5 μg/mL。细胞周期分析发现，化合物3 可导致SMMC-7721 细胞S 期阻滞；Western blotting 分析发现，化合物3 可使SMMC-7721 细胞中细胞周期负调控蛋白p27 的表达上调，并且Cleaved-PARP 蛋白被明显活化。结论 化合物7 为1 个新的天然产物。化合物3 能诱导SMMC-7721 细胞凋亡；其对SMMC-7721 细胞的增殖抑制作用与S 期细胞周期阻滞相关，并受到p27 蛋白的调控。

【关键词】 山麻黄 内生真菌 细胞毒活性 N-methyl-1H-indole-2-carboxamaide deoxyleporin B

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